百合的组织培养

第一节快速繁殖

一．外植体的选择与消毒

（一） 外植体

百合鳞片、鳞茎盘、球茎、叶片和花器官（花蕾、花丝）、种子（胚）和根等，都可以用作外植体，分化出苗。外植体应从健壮、无病毒的百合植株上采取，然后进行消毒处理、培养时可切割成5-8mm左右的小块或切断。

（二） 外植体的消毒

优选生长健壮、开花性状好的种球作为外植体。在取材前，做好将准备接种的鳞茎在4-5℃的低温下处理6-8周。

鳞茎→洗衣粉常规清洗→剥去鳞茎外皮及外部2-3层鳞片，切取少许顶部及基部→用70%酒精消毒30-60s→饱和漂白粉上清液或0.1%升汞灭菌10-20min→无菌水冲洗4-8次→切块接种。

花器官培养时，常取未开放的花蕾。

花蕾→用70%酒精消毒30-60s→0.1升汞灭菌15min→无菌水冲洗3-5次→切开，用镊子取出幼嫩花瓣，未成熟的子房、带花丝的花药等花器官→接种。

二．培养过程

（一） 培养基和培养条件

一般用MS标准培养基。蔗糖3%，按需要加各种激素。温度20-25℃，光强800-1500lx，光照9-14h/d,培养基PH值5.6-5.8

（二） 诱导培养基

1.   无菌种子播种用1/2MS培养基不加任何激素即可

2.   鳞片培养鳞片切块→接种于MS+BA0.1-1+NAA0.1-1.0→5d鳞片周围开始膨大→10d切口处出现白色小鳞状凸起→15d左右长出绿叶及小鳞茎。

3.   在高NAA低BA培养基上可一次性形成植株，但幼苗根部有肿胀现像。相反高BA低NAA时形成大量小鳞茎凸起，从中分化出芽而无根。这样的苗可以转入生根培养基上（MS+IAA1+BA0.2或用NAA代替IAA）

4.   花柱和珠芽接种于MS+IAA1+BA0.2培养基上，可以直接分化出芽。若接种与MS+BA0.5-1.0+NAA0.3-1.0培养基上，一般先出现愈伤组织，然后从愈伤组织再分化带有小鳞茎的幼芽，在花器官中以花丝为材料，优于花柱合子房。

5.   根根切成小段接种在MS+BA0.5-1.0培养基上，形成肿胀的粗跟，再将其切成小段，转到MS+BA0.2的培养基便能分化出苗。经过5-6个月后，能形成直径17mm左右的鳞茎，经移栽成活情况良好，一些品种移栽后1年多即开出大而美丽的花朵。

6.   茎尖或茎段接种在MS+BA0.5-3+NAA0.1-2培养基→20d基部萌发6-10个侧芽→30d后发育为长度2-3min无根苗芽。实验结果表明，BA与NAA有利于丛生芽诱导，其中以BA2+NAA0.1-0.2效果最好。

7.   胚培养在杂交育种中，为防止杂种胚与母本胚乳间不亲和，有可能造成败育的情况下，可采取胚培养，以克服不亲和现象，有利于育种工作顺利进行。

8.   叶片接种在MS+BA2+NAA0.2培养基。

（三） 继代培养

将从各种外植体上诱导的小鳞茎，转接到MS+BA1-2+NAA0.1-0.5培养基上进行继代培养。在生长素浓度一定的情况下，随着BA浓度的增高，增值倍数趋于平缓，而且小鳞茎细小。所以，适当降低BA的浓度有利于小鳞茎的继代培养。

（四） 生根培养

将长2-3cm的无根苗切下，除去愈伤组织，接种到MS+NAA0.3-0.5（或IBA0.1-0.5）或1/2MS+IBA0.5+0.5%AC上培养，一般半个月左右就可张根。

（五） 驯化移栽

试管小鳞茎形成后，先在室内进行5-7d的驯化培养，然后取出小鳞茎，清洗培养基。将小鳞茎移栽至疏松的基质（可用园土：腐殖土：锯末=1:1:1，或蛭石，珍珠岩））上，加强水肥管理。保持相对湿度75%，自然光50%。当有3-4片真叶长出时，可以定值，一般一个月内正常出芽，一年内能长长开花。若将小鳞茎埋藏于湿沙并冷藏，则小鳞茎进入休眠状态，能储藏较长时间。

百合的组织培养，一点见解，望见笑。