草莓的组织培养
2013-12-19亚龙组培
草莓,组织培养

草莓是营养丰富、栽培广泛、深受人民喜爱的多年生草本果树。 近年来,各地生产中急需大批优良草莓苗,但采用常规苗木繁殖,繁殖系数较低,成本较高,现多采用组培技术繁殖草莓苗。 本研究通过草莓

茎尖组织培养,对草莓进行了试管苗快速繁殖试验,从而为草莓工厂化苗木繁殖打下基础。

一、母株选择

建立无菌株系中, 筛选母株是十分重要的工作,它关系到大量试管苗的质量问题。 母株应选择健康且已达到生育期的植株。 改善供试母株环境条件也是外植体成活的一个因素, 快繁用的母株必须保持在适于新梢继续萌发的条件下生长, 这样才有利于外植体生长。 为此,必须有一个带补充光照装置的温室,以满足草莓生长需要,并调节光质和温度,从而影响植株代谢,进而影响植物激素产生。

二、外植体表面消毒

取 1 毫米长未生根的幼嫩匍匐茎作为外植体,草莓对各种消毒剂特别敏感,尤其是乙醇。 消毒液浓度稍高,处理时间稍长,则造成外植体大量死亡,而处理过轻则会造成大量污染。 通过多次试验,最终确定了最佳消毒方法, 即 70%乙醇 10 秒+无菌水冲洗1 次+0.1%升汞 8 分钟+无菌水冲洗 5 次。 这种消毒方法污染率低,成活率高,恢复生长快。

三、外植体增殖

要使停止增殖的茎尖组织进入分化, 形成愈伤组织,需要一定的外源激素作用和培养条件的调节。对于成功的组织培养繁殖来说, 增殖率是一个主要指标。 它是指在每次转移过程中,产生数量最大的有效繁殖体单位。 这些繁殖体单位必须大小一致,且能不断增殖。促进外植体增值的生长素通常为细胞分裂素,与细胞分裂素配合使用的生长素, 通常是 IAA 或IBA。 本研究以 MS 为基本培养基 , 附加 6-BA 和IBA,以不同浓度配比研究生长素及浓度对外植体增殖的影响, 最终确定 MS 培养基附加 6-BA 1 毫克/升+ IBA0.1 毫克/升对外植体的增殖效果最好, 而且这种愈伤组织呈绿色、 紧密状态, 很容易产生不定芽。 草莓茎尖培养中若培养基适合,会出现质地坚硬的绿色瘤状愈伤组织,表面平滑且有光泽,其增殖速度慢,并且连成一体;若培养基不合适,则往往出现黄白色的舒松软绵的愈伤组织,其增殖速度快,象堆积在一起的球块,一碰就散。 前者可进一步分化出不定芽来,后者则不能形成不定芽。

四、根的分化

外植体大量增殖后多数情况下生成无根苗,所以要诱导根。降低 MS 无机盐浓度,有利于根的分化。本研究采用 MS 大量元素减半并附加 0.5 毫克/升IBA+0.1 毫克/升 NAA 诱导生根效果最好。 假如 NAA浓度偏高,组培苗在生根的同时,基部会产生较多泡沫状白色愈伤组织。 对已在增殖培养基内生根的草莓苗,若要移入生根培养基,则应将已发根的从根茎处切除,以利于重新发根,否则不但会影响新发根,老根也会因次生化而死亡。

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