中国兰花主要是兰科兰属中的地生兰,是我国传统名花。她芬芳清丽、婀娜多姿、高雅幽香。中国兰大致可分为春兰、蕙兰、建兰、墨兰、寒兰等几类。传统的繁殖方法为分株繁殖、繁殖系数低,而且无性繁殖病毒严重,引起劣变。国兰组织培养主要是茎尖培养进行快速繁殖,以及种子无菌播种用以杂交育种。
1. 茎尖组织培养技术
取6-13cm长的新芽→从植株基部切离→去除杂物→洗净、切成2-3cm的段→10%次氯酸钠溶液消毒10min→无菌水冲洗→无菌滤纸吸干→解剖镜下取茎尖和腋芽,脱毒取茎尖≦0.2mm,培养则取2mm以上,茎芽带2-3叶原基→固体培养基培养。
2. 原球茎的诱导
(1) 春兰茎尖或侧芽→接种于改良的MS+NAA5+10%CM的培养基→20~25℃黑暗条件下培养1-2个月→乳白色原球茎→光照9~10h/d→三周后原球茎变绿→转移至MS+MS+NAA2.5+10%CM培养基上→1.5月后→绿色原球茎;
(2) 建兰和秋兰茎尖分生组织或侧芽→接种于White+ NAA5+10%CM的培养基→25℃黑暗条件下培养1-2个月→原球茎
(3) 蕙兰茎尖(2~3cm)→接种于KC+NAA1+KT0.1培养基上→30d形成原球茎→分化芽→转移至KC+IBA0.5培养基上→长根→形成完整苗;
在培养过程中茎尖顶端若用解剖刀或针损伤后,其基部可以生成更多原球茎形成的原球茎若切块繁殖在原来的培养基上10~15天后就可增殖出数个原球茎。
从大多数品种的培养上看春兰类似无机盐和和铵态氮含量低而生长势高的培养基为好。国兰茎尖培养褐变较严重,所以在切割外植体时,不应切太小。
原球茎的增殖
原球茎可经过不断的切割而增值,国兰的原球茎增殖以固体、液体培养交替进行,也可进行固体培养。
3. 成苗与壮苗
可将原球茎转入B5+NAA0.2+BA2.5培养基上,在25℃、1000lx光照10-16h下,不久便可分化出根芽,而形成完整的植株,国兰植株一般需要壮苗培养才可出瓶移栽。
国兰茎尖组织培养技术,希望能与大家多多交流,谢谢!